白藜芦醇降血尿酸 、抗炎作用研究进展

白藜芦醇（esveratrol）又名茋三酚（3,4′,5-三羟基二苯乙烯），分子式为C₁₄H₁₂O₃，相对分子质量228.25，是植物在不利条件下，如紫外线照射、真菌感染以及机械性损伤所产生的“植物补体”，主要存在于葡萄、决明、虎杖、花生等食用、药用植物中。现代研究表明，白藜芦醇具有抗炎^[1]、抗血栓、抗脂质过氧化^[2]、抑制血小板聚集、抗肿瘤等^[3]药理作用，是很多种中药治疗炎症、脂类代谢和心脏疾病的有效成分^{[4, 5]}，可通过植物提取或化学合成大量制备^{[6, 7]}。目前，白藜芦醇的应用主要集中在膳食补充剂、食品饮料和化妆品领域。美国推出了多种白藜芦醇膳食补充剂，如HBA国际公司生产的银杏＋白藜芦醇脑健康补充剂，Natural Source品牌的辅酶姜黄素＋白藜芦醇抗衰老补充剂，GNC品牌的白藜芦醇健康变老增补剂等，荷兰研究人员还开发出白藜芦醇＋表没食子儿茶素没食子酸酯的减肥产品；日本将白藜芦醇作为食品添加剂加到各种酒中，配制出对心血管疾病有良好预防作用的低醇、高白藜芦醇新型保健佐餐酒；我国亦开发了许多降脂、抗氧化、提高免疫力的白藜芦醇产品，如天狮集团的活力康胶囊、天津益倍建生物技术有限公司开发的传世系列白藜芦醇复合物等。世界知名的化妆品品牌Caudalie、Shiseido、AVEDA及国产品牌欣奕等均推出含白藜芦醇的高档护肤品。

近年来多项研究表明白藜芦醇具有良好的降尿酸活性和显著的抗炎作用。尿酸是人类嘌呤代谢的终产物，主要经过肾脏排泄，当人体内嘌呤代谢紊乱和（或）尿酸排泄减少时，会导致高尿酸血症。痛风是在高尿酸血症的前提下出现的急性关节炎、痛风石、慢性关节炎、关节畸形、慢性间质性肾炎和尿酸性尿路结石。近年来痛风及高尿酸血症的患病率逐年上升，在中国有男性患病高于女性、城市居民明显高于农村的特点。类风湿关节炎是一种全身性自身免疫性疾病，可导致关节畸形及功能丧失，全世界平均发病率为1%，我国患病率为0.3%～0.4%。目前临床上常用的可降低血浆尿酸水平的药物和治疗类风湿性关节炎的药物，常因毒副作用较大和应答效果不佳而受到限制。因此开发安全有效的新型降尿酸药物和抗类风湿性关节炎药物显得尤为迫切，而白藜芦醇在降尿酸和抗炎方面表现出了良好的活性，且安全性较高，因此本文对近年来白藜芦醇在降血尿酸和抗炎方面的药理作用和机制进行综述，以期为开发治疗痛风和类风湿性关节炎等疾病的新药提供参考。

1 降血尿酸陈旅翼等^[8]以别嘌醇为阳性对照，对白藜芦醇体内外降尿酸活性进行了研究。实验发现白藜芦醇具有较好的抑制黄嘌呤氧化酶的活性，其半数抑制浓度（IC₅₀）为47.53 μmol/L，通过进一步酶抑制动力学实验发现其为黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂，速度常数（K_i）值为33；体内实验给大鼠ig 10%的果糖水溶液连续8周造模成功，分别ig给药4周后，发现白藜芦醇两个剂量（37.5、18.75 mg/kg）均能显著降低大鼠血清尿酸水平，并能抑制肝脏黄嘌呤氧化酶的活性。同时该实验还对尿酸排泄与肾功能等指标也进行了考察，发现白藜芦醇对血清肌酐和血清尿酸氮有明显的改善，而对尿液中尿酸排泄量无效。该实验表明白藜芦醇降尿酸的作用机制可能是通过抑制黄嘌呤氧化酶的活性而实现的。

白藜芦醇不仅在大鼠体内具有降尿酸的活性，在临床试验中也有良好的表现。Ardea生物科学有限公司在药物-药物相互作用和药效学研究的Ⅱa临床试验中发现候选药物RDEA594与白藜芦醇合用治疗高尿酸血症和痛风获得阳性结果，临床实验入选患者尿酸水平≥90 mg/L，每天分别服用400 mg RDEA594和40 mg白藜芦醇，可使血液中尿酸水平较基线分别降低49%和45%，而两药合用后可降低70%，尿酸平均值降至12 mg/L，耐受性良好^[9]。

由上述研究可以看出，白藜芦醇具有良好的降尿酸活性，具备极大的开发价值。但是其作用机制尚不十分明确，仍需进一步深入研究。

2 抗炎 2.1 抗痛风性炎症痛风性关节炎主要病理改变为尿酸钠晶体在关节腔析出引发的关节及关节周围组织的炎症。痛风性关节炎发病过程中白细胞介素-1β（IL-1β），趋化因子CCR5、CXCL10明显增高，关节滑膜的核转录因子（NF-κB）p65表达增多。王鹏^[10]对白藜芦醇抗急性痛风性关节炎疗效及机制进行了研究，给关节炎大鼠ig白藜芦醇低、中、高[250、500、1000 mg/(kg·d)]3个剂量，连续7 d，模型组及给药组于ig第4天注射25 mg/mL（0.05 mL）的尿酸盐溶液到踝关节腔内，制备急性痛风性关节炎模型，正常对照组大鼠关节腔内注射生理盐水，分别于ig 2、9、24、48、72 h取血，72 h后留取踝关节关节液，观察各组不同时间点关节肿胀指数的变化及检测血清关节液中IL-1β、趋化因子受体-5（CCR5）、CXC趋化因子配体10（CXCL10）的变化。结果表明，关节液中白藜芦醇高剂量组IL-1β含量为6.66 pg/mL，与模型组11.85 pg/mL比较明显下降；高剂量组CCR5含量为4.65 ng/mL，与模型组5.64 ng/mL比较明显下降，中、高剂量组CXCL 10含量分别为86.79、89.61 pg/mL，与模型组110.13 pg/mL比较亦明显下降。同时，通过蛋白印迹处理血清，结果显示高剂量组白黎芦醇处理的关节滑膜NF-κB p65的表达值为0.53，相对于对照组的0.85有所下降。此实验表明，白藜芦醇可减轻急性痛风性关节炎大鼠踝关节组织水肿和炎性细胞浸润从而缓解痛风性关节炎，并呈一定的剂量相关性。作用机制可能是通过抑制IL-1β的分泌及关节滑膜NF-κB p65的表达进而抑制炎症过程中相关信号通路，减少炎症因子及趋化因子的生成，从而减少中性粒细胞向关节腔的趋化，改善局部滑膜组织炎症浸润和增生。

沉默调节因子1（silent information regulator 1,Sirt l）可通过抑制NF-κB和AP-1的转录活性以及下调多种炎症相关因子的表达来缓解炎症^[11]。白藜芦醇为Sirt l的激动剂之一。陈海燕^[12]用白藜芦醇处理高尿酸血症的小鼠0、3、7、14、21 d，检测血尿浓度发现其与白藜芦醇处理时间呈负相关。此研究表明，白藜芦醇可增加Sirt 1的活性，从而减轻小鼠急性痛风关节炎症，且其抑制炎症的作用呈明显时间、浓度相关性。

2.2 调节类风湿性关节炎炎症因子类风湿性关节炎滑膜组织中的巨噬细胞、成纤维样滑膜细胞、T细胞产生大量的前炎性细胞因子，如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-1、IL-6。TNF-α是滑膜炎症反应的关键性细胞因子，可显著刺激类风湿关节炎患者滑膜细胞的增生，并可引起关节肿胀。IL-1β、TNF-α是促炎作用和关节破坏的中心环节的关键促炎物质，这些高水平的细胞因子在类风湿关节炎的急性滑膜炎症、慢性滑膜纤维化、软骨和骨破坏等病情进程中起主导作用。白藜芦醇的抗炎作用主要体现在对这些炎症因子的抑制作用。安梅^[13]的实验用高、低（15、5 mg/kg）两组浓度的白藜芦醇溶液ig佐剂型大鼠，连续给药16 d后取血清样本检测，以雷公藤多苷（100 mg/kg）作为阳性对照。结果表明，佐剂性关节炎大鼠释放IL-1β、TNF-α明显高于正常组，白藜芦醇治疗组能明显下调佐剂性关节炎大鼠致炎因子IL-1β、TNF-α的表达，这可能是白藜芦醇对佐剂性关节炎大鼠治疗作用机制之一。高戈等^[14]在研究白藜芦醇对兔实验性骨关节炎IL-1β表达的影响的实验中也发现高、中剂量的白藜芦醇能抑制模型组动物软骨细胞合成IL-1β，其能力优于阳性对照药双醋瑞因。

蒋轩^[15]给4组新西兰大白兔分别ig高、中、低（120、60、30 mg/kg）浓度的白藜芦醇以及0.1%二甲亚砜（对照组），喂养6周后取右关节软骨检测软骨组织蛋白。结果显示白藜芦醇高、中、低剂量组和对照组的评分分别为2.42、2.63、3.13、7.72。该实验表明白藜芦醇能有效降低软骨组织中的炎症因子IL-1β和iNOS的产生，起到抗类风湿性关节炎的作用。杨建辉等^[16]给西兰大白兔ig临床等效剂量的白藜芦醇，制备含10%、20%、40%白藜芦醇的含药血清，与人骨关节炎滑膜细胞共培养48 h，以正常兔血清培养细胞为对照。运用ELISA法检测发现白藜芦醇含药血清组体外培养滑膜细胞的IL-18、IL-1β、TNF-α分泌量较正常兔血清的分泌量明显降低。

白藜芦醇对痛风和类风湿性关节炎细胞的炎症因子IL-1β、CCR5、CXCL10、NF-κB p65、IL-18、TNF-α等有很强的抑制作用，通过抑制其产生来减少血中炎症因子的浓度，从而达到抗炎效果。在分子层面上阐述了白藜芦醇抗炎的作用机制。

2.3 抑制滑膜细胞过度增殖，促进滑膜细胞凋亡类风湿关节炎是自身免疫性疾病，主要表现为关节炎症的产生和滑膜细胞的过量增殖及滑膜细胞的正常凋亡速率不足。在类风湿关节炎细胞中，滑膜组织过度增生、血管翳侵蚀关节软骨及其下面的骨组织^[17]。在骨关节区，由于滑膜细胞数量增加的刺激和压迫骨组织，造成了炎症的发生。唐玲丽等^[18]用3～5代类风湿关节炎滑膜细胞加入不同浓度的白藜芦醇（0、50、100、200、400、800、1 600 μmol/L）培养24 h后，流式细胞仪检测发现药物各浓度组对类风湿关节炎滑膜细胞增殖的抑制率分别为0、9.08%、22.4%、38.3%、51.6%、64.9%及88.9%。此实验表明白藜芦醇对类风湿关节炎细胞增殖有明显抑制作用，且该作用随药物浓度的增加而增强。其作用机制可能是白藜芦醇通过诱导冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶活化，从而诱导类风湿关节炎滑膜细胞的凋亡。

杨珺等^[19]用传代（3～5代）的佐剂性关节炎滑膜细胞37 ℃培养48 h后，加入含20%胎牛血清的DMEM培养液配制的不同浓度的白藜芦醇溶液（0、1、5、20、50 μmol/L）100 μL，培育48 h，以不含药物的培养基为对照组，用酶标仪检测，发现高浓度的白藜芦醇对滑膜细胞的杀灭作用最强，表明白藜芦醇可抑制关节炎大鼠滑膜细胞的增生。类风湿性关节炎的主要发病原因为滑膜细胞的大量增殖，因而通过此作用机制白藜芦醇可达到治疗类风湿性关节炎的作用。白藜芦醇对痛风和类风湿性关节炎滑膜细胞实验发现，其通过诱导滑膜细胞的凋亡来缓解炎症的发生。

3 结语